Investigadores de la Universidad Johns Hopkins han desarrollado un novedoso ensayo rápido que puede detectar anticuerpos contra el SARS-CoV-2 utilizando métodos ampliamente disponibles medidores de glucosa Fuente de confianza. Este nuevo ensayo de anticuerpos basado en un medidor de glucosa es más fácil de realizar y más rentable que los ensayos estándar de oro actuales.
Uno de los coautores del estudio, el Dr. Jamie Spangler , profesor de la Universidad Johns Hopkins, dijo: «Este trabajo presenta un enfoque innovador para democratizar la disponibilidad de datos de protección inmunológica mediante el uso de glucómetros comerciales para medir cuantitativamente los niveles de anticuerpos dirigidos contra enfermedades».
El estudio aparece en el Journal of the American Chemical Society
Las pruebas para el diagnóstico de COVID-19 detectan la presencia de material genético viral o proteínas. Por el contrario, los ensayos que miden anticuerpos contra el SARS-CoV-2 pueden ayudar a evaluar la exposición pasada al virus.
Estos anticuerpos incluyen anticuerpos IgG , que son el tipo predominante de anticuerpos presentes en la sangre. Los anticuerpos IgG juegan un papel vital en la producción de una respuesta inmune contra bacterias y virus, incluido el SARS-CoV-2.
En particular, estos anticuerpos IgG persisten durante meses después de una infección por SARS-CoV-2 o después de recibir una vacuna contra el COVID-19.
Los niveles de anticuerpos IgG sonproféticoFuente de confianzadel grado de protección frente a una infección sintomática por SARS-CoV-2. Por lo tanto, evaluar los niveles de anticuerpos en la población puede ayudar a determinar cuánto tiempo persiste la inmunidad contra COVID-19 después de la vacunación o una infección previa.
La aparición de nuevas variantes del SARS-CoV-2 también ha generado temores sobre la disminución de la inmunidad, por lo que es crucial evaluar los niveles de protección inmunológica en la población. Por lo tanto, determinar los niveles de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 podría ayudar a orientar las decisiones políticas sobre la necesidad de vacunas de refuerzo.
Ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA)Fuente de confianzason el estándar de oro para medir los niveles de anticuerpos. Sin embargo, la cuantificación precisa de los niveles de anticuerpos mediante ELISA requiere que las muestras de sangre se envíen a laboratorios especializados debido a la necesidad de costosos dispositivos de detección. Como resultado, la realización de estos ensayos lleva mucho tiempo, es costosa y requiere técnicos capacitados.
Aunque se han desarrollado pruebas ELISA rápidas para su uso en la clínica, estas pruebas solo brindan información cualitativa y siguen siendo costosas. Por lo tanto, existe la necesidad de alternativas rentables y ampliamente accesibles a los ELISA que puedan ser utilizadas por los médicos o el público en general.
uso de medidores de glucosa disponibles comercialmente para la detección de anticuerpos puede reducir el costo de la detección y la necesidad de técnicos calificados.
Estas pruebas involucran anticuerpos u otras moléculas de detección junto con la enzima invertasa que descompone la sacarosa o el azúcar en glucosa. Los anticuerpos acoplados con invertasa se unen a la proteína de interés en una muestra y producen glucosa tras la introducción de una solución de sacarosa. La cantidad de glucosa producida es proporcional a la cantidad de proteína de interés y se puede detectar con un medidor de glucosa.
Sin embargo, el acoplamiento de anticuerpos con invertasa ha resultado difícil. En algunos estudios, los investigadores han acoplado indirectamente la invertasa con anticuerpos con la ayuda de compuestos intermedios como las nanopartículas. Sin embargo, tal enfoque puede causar variaciones en la cantidad de acoplamiento y produce resultados inconsistentes.
Investigadores de la Universidad Johns Hopkins han desarrollado ahora un ensayo novedoso que involucra anticuerpos que se acoplan directamente con dos moléculas de invertasa. Los investigadores utilizaron células cultivadas en laboratorio modificadas genéticamente para expresar estos anticuerpos fusionados con moléculas de invertasa.
En contraste con el acoplamiento indirecto, la fusión genética del anticuerpo y la enzima invertasa asegura que un número constante de moléculas de invertasa se unan al anticuerpo. Estos anticuerpos junto con la invertasa pueden unirse a todos los anticuerpos IgG humanos.
El nuevo ensayo utiliza una tira de plástico recubierta con la proteína de punta SARS-CoV-2. Tras la incubación de la tira con muestras de sangre de personas con antecedentes de COVID-19, los anticuerpos específicos del SARS-CoV-2 se unen selectivamente a las proteínas de punta que recubren la superficie de la tira.
Después de enjuagar la tira para eliminar los anticuerpos no específicos, la tira se transfiere primero a una solución que contiene la proteína de fusión anticuerpo-invertasa y luego a una solución de sacarosa.
Los anticuerpos IgG específicos del SARS-CoV-2 unidos a la proteína de punta en la tira pueden ser detectados por la proteína de fusión anticuerpo-invertasa. La enzima invertasa posteriormente descompone la sacarosa en glucosa, que se puede detectar con un medidor de glucosa. El ensayo produce glucosa en proporción a los anticuerpos IgG específicos de SARS-CoV-2 en la muestra de sangre.
En el presente estudio, los investigadores encontraron que el ensayo de proteína invertasa de anticuerpos basado en un medidor de glucosa podía detectar con precisión anticuerpos IgG contra el SARS-CoV-2 y su rendimiento era comparable con los ELISA disponibles comercialmente.
La proteína de fusión anticuerpo-invertasa reconoce todos los anticuerpos IgG producidos por el cuerpo humano, lo que hace que este ensayo sea versátil.
“El objetivo inmediato de esta tecnología es ampliar la fabricación para permitir un amplio despliegue. Esperamos utilizar los datos emergentes de esta plataforma para correlacionar la protección contra enfermedades con los niveles de anticuerpos en una amplia gama de temas”, dijo el Dr. Spangler.
El ensayo podría usarse contra otras condiciones al recubrir la tira con una proteína que no sea la proteína de punta del SARS-CoV-2 de tipo salvaje. Por ejemplo, las tiras recubiertas con la proteína espiga de una variante del SARS-CoV-2 podrían usarse para medir los niveles de anticuerpos contra esa variante.
Fuente: medicalnewstoday.